技术流程图：
固定-脱水-渗透-包埋-修块-切片-染色-TEM
细胞、细菌等样品：
1. 固定
1）前固定：收集样品，缓冲液冲洗后加入 2.5%戊二醛缓冲固定液（电镜品质），4℃ 固定 2 小时以上，最好过夜；
2）冲洗：缓冲液冲洗3次，每次5-9分钟，水洗1次，7-10分钟；
3）后固定：向样品中加入1%或2%四氧化锇固定液进行后固定, 4℃固定1-3小时；
4）冲洗：缓冲液冲洗3次，每次5-9分钟。
2. 脱水
用30%——50%——70%——80%——90%——100%——100%酒精对样品进行梯度脱水, 每步5-10分钟，为保证脱水完全，100%酒精重复2-3次。
3. 渗透（根据环氧树脂的品种，严格按配方比例混合并搅拌均匀）
丙酮置换样品中酒精，5-10分钟；
然后进行环氧树脂的渗透，每步比例与时间分别为：
丙酮：环氧树脂= 3:1，1-3小时（室温）
丙酮：环氧树脂= 1:1，1-3小时（室温）
丙酮：环氧树脂= 1:3，3小时-过夜（室温）
环氧树脂 100%： 12-24小时（室温）
以上各步都在旋转混合仪上进行摇晃旋转，以加速渗透。
4. 包埋与聚合
1）包埋液的配制：向100%环氧树脂中加入1.5%-2%的催化剂，混合后搅拌20-30分钟；
2）样品的放置：树脂注入包埋模具或胶囊中,再将样品按所需的方位摆放在包埋模具或胶囊的树脂中，样品一定要放置在底部，防止聚合过程中移动；
3）聚合：45℃预聚合12小时，然后60℃聚合24小时。
5. 切片（略）
6. 染色（略）
植物组织（叶片、茎、根等）与真菌：
1. 固定
1）前固定：采集样品，缓冲液冲洗后，将样品放入2.5% 戊二醛缓冲固定液（电镜纯度）中。样品抽真空让其沉入固定液，确保固定液充分进入细胞，4℃固定过夜；
2）冲洗：缓冲液冲洗3次，每次5-9分钟，水洗1次，7-10分钟；
3）后固定：向样品中加入1%或2%四氧化锇固定液进行后固定, 室温或4℃固定3-4小时；
4）冲洗：缓冲液冲洗3次，每次5-9分钟。
2. 脱水
用30%——50%——70%——80%——90%——100%——100%酒精对样品进行梯度脱水, 每步20-30分钟，为保证脱水完全，100%酒精重复2-3次。
3. 渗透（根据环氧树脂的品种，严格按配方比例混合并搅拌均匀）
丙酮置换样品中酒精，20-30分钟；
然后进行环氧树脂的渗透，每步比例与时间分别为：
丙酮：环氧树脂= 3:1，3小时（室温）
丙酮：环氧树脂= 1:1，3小时（室温）
丙酮：环氧树脂= 1:3，3小时-过夜（室温）
环氧树脂 100%： 24-72小时（室温）
以上各步都在旋转混合仪上进行摇晃旋转，以加速渗透。
4. 包埋与聚合
1）包埋液的配制：向100%环氧树脂中加入1.5%-2%的催化剂，混合后搅拌20-30分钟；
2）样品的放置：树脂注入包埋模具或胶囊中,再将样品按所需的方位摆放在包埋模具或胶囊的树脂中，样品一定要放置在底部，防止聚合过程中移动；
3）聚合：45℃预聚合12小时，然后60℃聚合24小时（Spurr树脂70℃聚合24小时）。
5.切片（略）
6.染色（略）
活体动物组织：
1. 固定
1）灌流固定：①脑、心脏等组织：用2.5%戊二醛和4%多聚甲醛混合缓冲固定液对实验动物进行灌流固定；②肝、肺等其他组织：可在腹腔中滴入上述混合固定液后取材；
2）前固定：迅速取出实验组织所需部位，用手术剪或锋利的刀片快速切割为不大于1mm3的组织块，投入2.5% 戊二醛缓冲固定（电镜纯度）中，4℃或室温固定2小时以上；
3）冲洗：缓冲液冲洗3次，每次5-9分钟，水洗1次，7-10分钟；
4）后固定：向样品中加入1%或2%四氧化锇固定液进行后固定, 室温或4℃固定1-3小时；
5）冲洗：缓冲液冲洗3次，每次5-9分钟。
2. 脱水
用30%——50%——70%——80%——90%——100%——100%酒精对样品进行梯度脱水, 每步20-30分钟，为保证脱水完全，100%酒精重复2-3次。
3. 渗透（根据环氧树脂的品种，严格按配方比例混合并搅拌均匀）
丙酮置换样品中酒精，5-10分钟；
然后进行环氧树脂的渗透，每步比例与时间分别为：
丙酮：环氧树脂= 3:1，1-3小时（室温）
丙酮：环氧树脂= 1:1，1-3小时（室温）
丙酮：环氧树脂= 1:3，3小时-过夜（室温）
环氧树脂 100%： 12-24小时（室温）
以上各步都在旋转混合仪上进行摇晃旋转，以加速渗透。
4. 包埋与聚合
1）包埋液的配制：向100%环氧树脂中加入1.5%-2%的催化剂，混合后搅拌20-30分钟；
2）样品的放置：树脂注入包埋模具或胶囊中,再将样品按所需的方位摆放在包埋模具或胶囊的树脂中，样品一定要放置在底部，防止聚合过程中移动；
3）聚合：45℃预聚合12小时，然后60℃聚合24小时。
5. 切片（略）
6. 染色（略）
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